細(xì)胞系特征

細(xì)胞名稱(chēng)：PC-12   (未分化)大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞

描述； 該細(xì)胞系來(lái)自能移植的雄性大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤。 這些細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)受體。 NGF可誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)表型。 這些細(xì)胞不合成腎上腺素。

動(dòng)物種別； 大鼠

性別； 雄

 組織來(lái)源； 腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤

形態(tài)； 多角形

培養(yǎng)條件：

完全培養(yǎng)基：90%DMEM/F12（內(nèi)含2mM L-glutamine）+10%胎牛血清

培養(yǎng)條件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

傳代方法：

收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消DU后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造

成生長(zhǎng)不好。

凍存方法：

  凍存液：95%完全培養(yǎng)液，5%DMSO

  儲(chǔ)存：液氮儲(chǔ)存