試劑組成

1. 預(yù)包被板48T/96T;                          6. 樣本稀釋液(5號液) 1支;

2. 酶結(jié)合物(1號液) 1支;                      7. 終止液(6號液) 1支;

3. 洗滌液(2號液) 1支;                         8. 陽性對照品 1支;

4. 底物(3號液) 1支;                            9. 陰性對照品 1支;

5. 顯色劑(4號液) 1支;                        10. 使用說明書 1份;

操作程序

• 加樣反應(yīng)：取出所需量的反應(yīng)板條，每孔加樣本稀釋液（5號液）2滴，再分別加入待檢的血清樣本10ul，混勻。同時設(shè)陰性、陽性及空白對照各1孔，陰性、陽性對照與待檢樣本同步處理，空白對照孔僅加入樣本稀釋液（5號液）2滴。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液(2號液)1滴，立即用蒸餾水注滿，靜置30秒后甩去，再直接用蒸餾水洗滌四次，甩去，拍干。
• 加酶反應(yīng)：除空白對照孔外其余每孔加酶結(jié)合物(1號液)2滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。
• 顯色反應(yīng)：加底物(3號液)和顯色劑(4號液)各1滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)1滴，混勻，終止反應(yīng)（加終止液后藍(lán)色會變?yōu)辄S色）并觀察結(jié)果。

結(jié)果判斷

• 肉眼觀察：陰性對照接近無色，陽性對照呈明顯黃色，表示試驗有效。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性，待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。
• 儀器判斷：以空白對照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm（620nm作參比波長）讀取O.D值，待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性。當(dāng)陰性對照O.D值低于0.05時按0.05計算。

注意事項

• 試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
• 洗滌時將蒸餾水加滿孔內(nèi)，每次停放三十秒鐘，甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源。
• 為提高試驗的可比性，建議使用儀器判讀結(jié)果。
• 如有條件，*好使用水浴箱孵育。